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質譜級 賴氨酰肽鏈內切酶 Lysyl Endopeptidase

貨號:125-05061
包裝:20ug x5
  • 英文名:Lysyl Endopeptidase, Mass Spectrometry Grade
  • 級別:for Proteome Research
  • 分子量:27,500
  • 品牌:Wako
  • 外觀:Lyophilisate. Keep at -20 degrees C.
賴氨酰肽鏈內切酶(Lysyl Endopeptidase)可以特異性剪切除賴氨酸殘基C末端和S-氨乙基半胱氨酸殘基的肽鍵,用于蛋白測序和Lys-X 化合物的酶催化合成。該酶(#125-05061)穩定性高,在4M 尿素或0.1%SDS 溶液中30度孵育6小時之后,仍然擁有完整的生物活性。

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質譜級 賴氨酰肽鏈內切酶 Lysyl Endopeptidase
賴氨酰肽鏈內切酶(Lysyl Endopeptidase)最初由Masaki等人從土壤細菌中分離得到。該酶可以特異性剪切除賴氨酸殘基C末端和S-氨乙基半胱氨酸殘基的肽鍵,用于蛋白測序和Lys-X 化合物的酶催化合成。作為Wako官方授權分銷商,西寶生物專業提供Wako多種級別賴氨酰肽鏈內切酶,該酶穩定性高,在4M 尿素或0.1%SDS 溶液中30℃孵育6小時之后,仍然擁有完整的生物活性。訂購熱線:400-021-8158
質譜級賴氨酰肽鏈內切酶是質譜分析前處理時最常用的蛋白分解酶。若同時使用賴氨酰肽鏈內切酶和胰酶,可更好地切斷賴氨酸基團的多肽,增加多肽的數量。產品已按照使用習慣做成小包裝,是方便使用的冷凍干燥品。
質譜級 賴氨酰肽鏈內切酶 Lysyl Endopeptidase 理化特性
表1賴氨酰肽鏈內切酶理化特性表
外觀
凍干粉(包含2 mmol/L Tris-HCl buffer,pH 8)
活性
0.03~0.07AU/vial
分子量
27,000(凝膠過濾);30,000 (SDS-PAGE)
溶解性
易溶于水或緩沖液
最佳pH
9.0-9.5(酰胺酶的最佳活性pH)
等電點
6.9-7.0
抑制劑
DFP、PMSF、TLCK
來源
細菌
穩定性
溶于pH 值5.0-12.0 的Tris緩沖液中,可于4℃穩定保存2年。溶于pH 值6.0-11.0 的緩沖液中,可于30℃穩定保存,但是50℃及以上不穩定。
單位定義
一單位酰胺酶(AU) 指在30℃ pH 9.5 時每分鐘產生1 μmol 對硝基苯胺所需的酶量。
底物特異性
水解底物:Tos-Lys-Ome、Bz-Lys-NH2、Bz-Lys-pNA、Lys-pNA
非水解底物:Bz-Arg-NH2、Bz-Arg-pNa、Arg-pNA
質譜級 賴氨酰肽鏈內切酶 Lysyl Endopeptidase 產品特點
賴氨酰肽鏈內切酶
  • 高特異性、高蛋白質消化率、適用于蛋白質譜分析
  • 提高裂解效率、增加肽段數量
  • 根據使用量特意制備小包裝,方便使用
 
質譜級 賴氨酰肽鏈內切酶 Lysyl Endopeptidase 應用實例
分別采用胰蛋白酶(Tp)、賴氨酰肽鏈內切酶(Lep) 和Tp 與Lep聯用進行膠內酶切的效果比較:牛血清蛋白BSA 的條帶(100ng) 通過SDS-PAGE 獲得,然后分別用Tp、Lep 和Lep+Tp 進行酶切,再用MALDI-TOFMS 法進行分析。蛋白酶的實驗效果如下表:
表2 Tp、Lep 和 Lep+Tp 的蛋白酶酶切結果對照
 
Tp
Lep
Lep +Tp
裂解位點
精氨酸和賴氨酸的C端
賴氨酸的C端
精氨酸和賴氨酸的C端
錯誤裂解率 
(錯誤裂解所占比例)
多(8%)
很少(0%)
少(3%)
鑒定出的多肽數量
17
19
22
結果表明 Lep 酶解的錯誤裂解率最低,Tp酶解時加入Lep后,錯誤裂解率有所降低,同時,可以鑒定出更多的多肽。
胰蛋白酶 (Tp)(圖 a) 和賴氨酰肽鏈內切酶 (Lep)+Tp (圖 b) 酶切后的質譜結果對照圖
圖1 胰蛋白酶 (Tp)(圖 a) 和賴氨酰肽鏈內切酶 (Lep)+Tp (圖 b) 酶切后的質譜結果對照圖。
Lep+Tp酶切后,可以在m/z=2000時得到吸收峰,而單獨的Tp酶切在m/z=2000時沒有吸收峰。該結果表明Lep可以提高測序覆蓋度。
( 數據由大阪醫療中心和婦嬰健康研究所Y. Wada博士提供 )
質譜級 賴氨酰肽鏈內切酶 Lysyl Endopeptidase 產品列表
品牌
產品編號
產品名稱
產品規格
產品等級
Wako
Lysyl Endopeptidase, MS Grade
賴氨酰肽鏈內切酶,MS級
20μgx5
質譜級
Wako
Lysyl Endopeptidase (R)
賴氨酰肽鏈內切酶
1vial(2AU)
for Biochemistry
Wako
Lysyl Endopeptidase (R)
賴氨酰肽鏈內切酶
1vial(10AU)
for Biochemistry
質譜級 賴氨酰肽鏈內切酶 Lysyl Endopeptidase 參考文獻
  1. Wada, Y., and Kadoya, M.: J. Mass Spectrom., 38, 117 (2003).
  2. Shevchenko, A., Wilm, MM., Vorm, O., and Mann., M.: Anal. Chem., 68, 850 (1996).
西寶生物專業提供Wako賴氨酰肽鏈內切酶,正品保障,值得您信賴!(訂購熱線:400-021-8158
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